产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自柠檬酸杆菌属(
Citrobacter)2144(C. Nkenfou)的 CspCI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
使用浓度
5,000 units/ml
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 10%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 10%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
100 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
- 注意事项
- CspCI 在其识别序列的两侧进行切割,切下来一个含 2 碱基 3´ 突出末端的 ~35 bp 的片段。
- 酶切位点可能会左右移 1 个碱基,具体取决于识别位点两侧的 DNA 序列和酶切条件。
- 酶切需要两个或两个以上识别位点。请查看下表中的酶列表和使用建议以及背景信息文章。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
- CspCI 需要在反应中添加 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)以实现**活性(SAM 已添加在酶溶液中)。