- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 限制性内切酶酶切位点:RG/CY
CviKI-1 是一种限制性内切酶,具有 4 个特异识别位点以及多达 11 个松弛的非同源位点(星号位点)。
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有经克隆和修饰的 CviKI 限制性基因,该基因提取自 CA-1A [一种小球藻(
Chlorella)病毒]。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 25%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 100%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
同裂酶
CviJI
- 注意事项
- 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。如需了解更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
- 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性