DpnI
产品介绍
- 只有当识别位点被甲基化时,DpnI 才能切割。
- 哺乳动物基因组 DNA 的 CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
- 甲基化敏感的限制性内切酶
- 符合省时酶(Time-Saver)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
- 限制性内切酶酶切位点:GA/TC
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自肺炎双球菌( Diplococcus pneumoniae)G41(S. Lacks)的 DpnI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA(dam 甲基化)所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃ 1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 100%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 75% rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性 贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
500 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃ 热失活
80℃ for 20 minutes
甲基化敏感性 dam 甲基化: 不敏感 dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切 同裂酶 MalI
- 注意事项
- 只有当识别位点被甲基化时,DpnI 才能酶切。从 dam+ 菌株纯化而来的 DNA 才是 DpnI 的酶切底物。
- CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
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