糖元是许多葡萄糖组成的多糖,它是机体细胞储存糖的形式.机体各组织都能利用葡萄糖合成糖原,其中肝脏和肌肉储存的糖原最多,分别称为肝糖原和肌糖原.糖原是糖主要的储存形式,进食后过多的糖可在肝脏和肌肉中合成糖元储存起来,以免血糖过高.肝糖元不仅可以由葡萄糖、果糖和半乳糖合成,还可以由甘油、乳糖和某些氨基酸等非糖类物质合成.肝糖原可调节器血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低度时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖.因此,肝糖原对维持血糖的相对恒定十分重要.肌糖原不能直接分解成血糖.当肌肉活动剧烈时,肌糖原分解成大量的乳酸,除一部分可氧化供能外,大部分随血液循环到肝脏,通过糖异生转化为肝糖原或血糖.
测定原理:
糖原在浓硫酸的作用下可脱水生成糖醛衍生物,后者再与蒽酮作用形成蓝色化合物,与同法处理的标准葡萄糖溶液比色定量。糖原在浓碱溶液中非常稳定,故在显色之前先将组织放入浓碱中加热以破坏其它成分而保留糖原。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.7%。
4、回收试验: X =102%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
试剂组成与配制:(50 管/48 样)
试剂一:水解液,40ml×1 瓶,室温或 2~8°C保存 6 个月。
试剂二:1mg/ml 标准品贮备液,5ml×1 支,室温或 2~8°C保存 6 个月。
0.01mg/ml 标准应用液的配制:1mg/ml 标准品贮备液∶双蒸水=1∶99,现用现配。
试剂三:显色剂,粉剂×6 支,室温或 2~8°C保存 6 个月。用时每支加浓硫酸 25ml(浓硫酸自备),混匀,现用现配。
所需仪器及自备试剂:
1、可见分光光度计(比色测定波长为620nm)
2、沸水箱(温度为100℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
动物组织样本:准确称取组织样本按说明书进行操作。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按说明书操作准确组织重量加入碱液沸水浴20分钟
2、加入一定量的双蒸水制血备浓度的检测液
3、取一定量的检测液加入显色剂,沸水浴5分钟
4、620nm波长,1cm光径,比色