PflMI
产品介绍
- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 限制性内切酶酶切位点:CCANNNN/NTGG
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自荧光假单胞菌( Pseudomonas fluorescens)(R. Morgan)的 PflMI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X NEBuffer™ r3.1
Incubate at 37℃ 1X NEBuffer™ r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 0%
NEBuffer™ r2.1: 100% NEBuffer™ r3.1: 100%
rCutSmart™ Buffer: 50%稀释兼容性 贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃ 热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性 dam 甲基化: 不敏感 dcm 甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
CpG甲基化: 不敏感 同裂酶 AccB7I Van91I
- 注意事项
- λ DNA 上的特定 PflMI 位点,切割效率明显低于其他底物。
- dcm 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
- 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性
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