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HphI
HphI图片
限制酶产地:国产限制性内切酶


产品名称
限制性内切酶HphI
产品介绍
  • 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
  • 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割。
  • 限制性内切酶酶切位点:GGTGA(8/7)

产品来源

大肠杆菌菌株,携带来自副溶血嗜血杆菌(Haemophilus parahaemolyticus)(ATCC 49700)的 HphI 基因。

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 50%
    NEBuffer™ r2.1: 50%
    NEBuffer™ r3.1: <10%
    rCutSmart™ Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 B

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    300 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    500 µg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    65℃ for 20 minutes

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 阻断酶切
    dcm 甲基化: 阻断酶切
    CpG甲基化: 不敏感

    同裂酶

    AsuHPI

  • 注意事项

    1. 有人提出 HphI 可能在 N9/N8 处切割,具体取决于识别位点和切割位点之间的序列(Kang, C. and Wu, C.-W. (1987) Nucl. Acids Res. 15, 2279-2294; Cho, S.-H. and Kang, C. (1990) Mol. Cells 1, 81?86.)。在 ΦX174 DNA 上,使用 > 12 个单位的酶,温育时间超过 4 小时,会产生额外的切割产物。在其它 DNA 上,尚未出现此现象。低 pH 值和高甘油浓度会增强这种活性。
    2. dcm 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息,请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。
    3. 延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性
    4. 延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性

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