- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
- 酶切位点 CCTTC(6/5)
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自幽门螺杆菌(
Helicobacter pylori)26695(D.E.Berg)的 HpyAV 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg λDNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 100%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 25%
rCutSmart™ Buffer: 100%贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
0.1 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
0.5 mM NiSO4
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠影响酶切
同裂酶
Hin4II+
- 注意事项
- 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。如需了解更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- CpG 甲基化与酶切位点重叠影响酶切。
- 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性