AhdI
产品介绍
- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 限制性内切酶酶切位点:GACNNN/NNGTC
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila)(C. Polisson)的 AhdI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃ 1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 25%
NEBuffer™ r2.1: 25%
NEBuffer™ r3.1: 10% rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性 贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃ 热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性 dam 甲基化: 不敏感 dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切 同裂酶 BmeRI DriI Eam1105I
- 注意事项
- AhdI 是 Eam1105I 的同裂酶。
- AhdI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基 3´ 突出末端,它比平末端更难连接。
- CpG 甲基化与酶切位点重叠。
- 使用平末端/TA 连接酶预混液可实现更高效的连接
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