对于实验初学者由于实验经验有限或多或少缺少科研细胞实验不可忽视的小窍门以及实验中一定不能犯的错误。在科研细胞实验的广阔天地里,每一步都需谨慎而行。初学者往往容易忽视的无菌操作,便是其中至关重要的一环。细胞培养如同呵护娇嫩的幼苗,任何微小的污染都可能让实验功亏一篑。因此,严格遵循无菌技术,从穿戴实验服、手套,到使用酒精灯灼烧接种环,每一个细节都不容忽视。
实验记录的真实性与完整性也是初学者常犯的疏忽。每一次观察、每一次数据测量,都应及时、准确地记录下来。这不仅是对科研严谨性的体现,更是未来数据分析与论文撰写不可或缺的基础。切记,实验记录不应成为“回忆录”,而应成为科研路上的坚实足迹。
试剂的储存与使用同样讲究。不同试剂有着各自独特的保存条件,如温度、光照等。错误的存储方式不仅会缩短试剂的有效期,更可能直接影响实验结果。因此,熟悉并遵守每种试剂的使用说明书,是每位实验者必备的素养。
面对实验失败时的心态调整也至关重要。初学者往往因一次或几次的失败而气馁,但科研之路本就充满挑战。正确的做法是,从失败中汲取教训,调整实验方案,再次尝试。记住,每一次失败都是通往成功的宝贵经验。
1. 择正确的计算模式,如果数据不符合直线回归,就要用曲线回归计算。根据吸光度绘制标准曲线一般可以用:
(1)酶标仪本身有曲线拟合,常为CUBIC SPLINE 拟合,只要安说明书输入标准品的浓度和在酶标板中的位置就可以打出结果。
(2)可以用CurveExpert软件进行拟合
(3)用SPSS软件进行拟合
2. 加样器的使用,可调的使用前一定要复查加液量是否正确!
4. 注意吸头是有差异的,加标准曲线时用一个吸头,从低浓度向高浓度依次加样,如果作复孔,那么要提前设计好,把一个浓度的全部加完再加高浓度的。每次加完一个浓度后,用吸水纸擦干吸头的外壁并用力打出吸头内的残余液体。
5. 加样品时把样品按8个一排排好,做时每加样一个,就把它前移一排,这样不容易出错。
6. 注意酶标板的底部不要弄脏或划伤,不要用手摸酶标板的底部。
7. 注意按操作步骤计算试剂的量是否充足,注意有时按示例操作试剂根本不够!!!
8. 如果你要做很多样本,需要两板或以上的酶标板,注意把你的样本安分组平分到各个板,以减少板间差。