定量环适用于由不锈钢或生物相容性PEEK制成的注射器。下面来讲讲高效液相色谱仪不同定量环的影响!
如果仪器是自动进样:显然,循环的大小决定了你的最大进样量。如果使用100μl定量环,最大样品量必须小于100μl。如果仪器是手动注入:理论上准确的注入量是循环量的一半以上。也就是说,如果你的仪器是10μl,那么注射量在5μl-10μl范围内比较准确。如果注入1μl样品,结果的准确性将受到质疑。常见的手动注射回路为20μl,注射量多为满刻度。因为人工操作误差大。所以,在同一个实验中,平行的情况下,主要变化的是试液的浓度,而不是进样的大小。另外,一定要注意样品的清洁度,过滤。否则,不溶性微粒会堵塞环路,影响注射量。
使用定量环的注意事项:注射量和循环必须匹配吗?如果是20μl,按药典注射10μl。当注入量与回路匹配时,注入量应为回路的2倍左右。哪个更准确?
在这种情况下,您可以改为10μl循环来解决问题。您不能使用10μl注射针将样品注射到20μl定量环中。这是因为10μl样品必须在充满流动相的20μl定量环中有样品溶液的扩散过程。浓度会不断变化,导致每次进样的峰面积不同,无法准确测定。
从进样回路的结构也可以看出,10μl的注射量并不能全部进入定量环。注射残留无法消除。所以这种注射方式会造成每次注射量之间的偶然误差很大。鉴于以上两个原因,进样体积至少应为定量环填充样品体积的两倍。整个定量回路消除了浓度差引起的扩散过程和注射残留引起的注射体积误差,保证了注射的准确性。