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Omipalisib

2,4-二氟-N-[2-甲氧基-5-[4-(4-吡嗪)-6-喹啉]-3-吡啶]苯磺酰胺

品牌
J&K
CAS
1086062-66-9
货号
1024276
规格纯度
98%, 一种有效的高度选择性PI3K抑制剂
参考价格
2882 *本价格含增值税费
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服务
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数量
-+
产品名称:
1086062-66-9
Omipalisib
2,4-Difluoro-N-[2-methoxy-5-(4-pyridazin-4-ylquinolin-6-yl)pyridin-3-yl]benzenesulfonamide
2,4-二氟-N-[2-甲氧基-5-[4-(4-吡嗪)-6-喹啉]-3-吡啶]苯磺酰胺
产品介绍:

基本信息

分子式C25H17F2N5O3S
分子量505.50
存储条件Freezer -20℃

产品描述

Omipalisib (GSK2126458, GSK458)是一种高选择性的,有效的p110α/β/γ/δ和 mTORC1/2抑制剂,无细胞试验中Ki分别为0.019 nM/0.13 nM/0.024 nM/0.06 nM和0.18 nM/0.3 nM。Phase 1。

靶点(IC50 & Targe)

mTORC1,0.18nM(Ki)

p110α,0.019nM(Ki)

p110β,0.13nM(Ki)

p110γ,0.06nM(Ki)

p110δ,0.024nM(Ki)

体外研究

GSK2126458有效抑制人类癌细胞中发现的p110α(E542K, E545K, 和H1047R)常见激活突变型,Ki 分别为 8 pM, 8 pM 和 9 pM。GSK2126458作用于T47D和BT474 细胞,显著降低pAKT-S473水平,IC50分别为 0.41 nM 和 0.18 nM。 而且, GSK2126458作用于多种细胞系,包括T47D 和 BT474乳腺癌细胞系,导致细胞周期停在G1期,且抑制细胞增殖,IC50分别为3 nM 和2.4 nM。[1]

体内研究

GSK2126458作用于BT474人类移植瘤模型,降低pAKT-S473水平,这种作用存在剂量依赖性,按300 μg /kg低剂量处理抑制肿瘤生长,这种作用存在剂量依赖性。此外, GSK2126458 作用于四种临床前期物种(小鼠, 大鼠,犬 ,和猴 ),具有低血液清除力和良好口服生物有效性。[1]

激酶实验

体外均相时间分辨荧光技术(HTRF)测定 PI3K 抑制:

在384孔聚丙烯母板上,化合物 (3倍溶于100% DMSO) 从1列到12列,和13列到24列连续稀释,获得11种浓度 GSK2126458。6列和18列只含DMSO。滴定后,0.05μL 立即转移到384孔低容量实验板上。 实验板中含3种药物对照(PI3K 抑制剂)和3组实验对照: (1) 不含抑制剂的酶实验;(2) 去酶buffer, 和 (3)去酶加 PIP3的buffer。DMSO加到6列和18列的所有孔中。40 μM PIP3加到 1X 反应 buffer (1μL 200 μM PIP3)中, 交替 18列的行数 ( B, D, F, H, J, L, N, P)。不含酶的对照实验在 A, C, E, G, I, K, M, O孔中 (0.1μL 100% DMSO)中进行。使用 HTRF试剂盒优化PI3K 实验 。实验试剂盒中含7种试剂: 1) 4X 反应Buffer; 2) PIP2 (底物); 3) Stop A (EDTA); 4) Stop B (生物素-PIP3); 5) 检测混合物A (链霉亲和素-APC); 6)检测混合物 B (Eu-标记的抗-GST抗体和 GST标记的 PH域); 7) 检测混合物 C (KF)。通过使用去离子水按1:4稀释而制备PI3K反应 Buffer。加入新鲜制备的 DTT,终浓度为5 mM。加入酶,使用Multidrop Combi 在1X反应 buffer中加入2.5μL PI3K,加到每孔中 ,开始预温育化合物。实验板在室温下温育15分钟。 使用Multidrop Combi,加入 2.5μL 2X底物溶液(PIP2和 ATP,溶于 1X 反应buffer)开始反应。实验板在室温下温育1小时。 使用Multidrop Combi在所有孔中加入2.5μL 终止液 (Stop A和 Stop B按5:1比例预混合),反应淬灭。使用Mulitdrop Combi(检测混合物 C, 检测混合物 A,和检测混合物 B 按18:1:1比率混合,即: 6000 μL 总体积, 混合 5400 μL 检测混合物 C, 300μL 检测混合物 A, 和 300 μL 检测混合物 B)在所有孔中加入2.5μL 检测液,进行淬火反应,检测形成的产品。备注:这种溶液在使用前2小时制备。在暗中温育1小时后,在Envision 酶标仪上测量HTRF信号,在330nm 处测定激发光,在620nm (Eu) 和665nm (APC)处双重发射光。

细胞实验

Cell lines: BT474, HCC1954 和 T-47D

Concentrations: 0 到 1 μM

Incubation Time: 72 小时

Method: BT474, HCC1954 和 T-47D(人类乳腺)培养在含10%胎牛血清的 RPMI-1640 培养基中,培养在37oC下含 5% CO2的 孵育器中。在实验前2到3天,细胞按密度分到T75 烧瓶中,这样在实验收集时获得约70-80% 细胞汇合。使用0.25% 胰蛋白酶-EDTA收集细胞。在细胞悬液中使用台酚蓝染色排除染色,进行细胞计数。细胞按每孔1000个细胞接种在384孔黑色平底聚苯乙烯板中, 每孔含48 μL 培养基。所有实验板置于5% CO2, 37oC 下过夜,第二天加入 GSK2126458。使用CellTiter-Glo处理一个实验板,用于第一天测量。GSK2126458 在清澈见底的聚丙烯384孔板中制备,连续稀释两倍。4 μL 这些稀释液加到105 μL 培养基中混合溶液后, 细胞板的每孔中加入2 μL这些稀释液。所有孔中的 DMSO 终浓度为0.15%。细胞在37oC, 5% CO2 环境中温育 72小时。随后与 GSK2126458温育72小时。CellTiter-Glo试剂加到实验板中,使用与孔中细胞培养体积相当量的体积。震荡实验板约2分钟,在室温下温育约30分钟,然后在Analyst GT 读数器上读取化学分光信号。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 在小鼠体内移植BT474肿瘤

Formulation: GSK2126458 溶于DMSO,然后在水中稀释

Dosages: ≤300 μg /kg

Administration: 口服处理

(Only for Reference)

参考文献

[1] Knight SD, et al. ACS Med. Chem. Lett. 2010, 1 (1), 39–43.

[2] Greger JG, et al. Mol Cancer Ther. 2012, 11(4), 909-920.

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