产品介绍
此产品源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此产品不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。
产品特性
1) 来源:鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
2) 形态:不规则圆形,纺锤状,贴壁细胞,少量悬浮。
3) 含量:>1x10^6 数量
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及产品有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照产品接收后的处理方法操作。
产品接收后的处理
1)收到产品后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现瓶子破损、有液溢出及产品有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认产品状态,同时给刚收到的产品拍照(10×,20×)各2-3张以及瓶子外观照片一张留存,作为售后时收到时产品状态的依据。
3)贴壁产品:产品在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察产品的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对产品进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到产品后**次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺,0.11g / L丙酮酸钠) (推荐iCell-0001)培养基;优质胎牛血清10 %;P/S青霉素-链霉素 1%。
2) 注意事项:
(a)在产品生长的初始阶段,产品以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加,产品呈现圆形并以叠加的形式生长。产品密度达到一定的程度,会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中,镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。
(b)该产品传代时不需要用胰酶消化。传代时,用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。
(c)该产品形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时,产品会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起,有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来,离心后细胞沉淀可以继续培养。(d)血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。
3) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
该产品为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:
该产品用刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后**次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。
3) 细胞冻存: 收到产品后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。