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脐带间充质干细胞培养基套装,无血清,含谷氨酰胺含酚红
脐带间充质干细胞培养基套装,无血清,含谷氨酰胺含酚红图片
型号:HC-UC02R
包装:500ml
交货期:现货


产品名称
Serum-Free Medium For Mesenchymal Stem Cell With Glutamine and Phenol Red
产品介绍


01

产品介绍


01


可用于多种来源的间充质干细胞的原代细胞分离及传代培养,如:脐带(hUCMSCs)、脂肪(hADSCs)、骨髓(hBMSCs)等, 并保持细胞多向分化的潜能。

02


无血清,无任何动物源组分,不含抗生素,性能稳定,批间差异小。

03


高细胞扩增率,相同代次数量远高于市场上同类型产品。

04


自主化研发与生产体系,供货稳定,性价比高。

05


支持临床级 / 药品级细胞培养。


02

使用方法


01

添加物建议在 37℃环境下融化

02

加入培养基中充分混合均匀

03

生成完全培养基


完全培养基建议现用现配,一个月内用完(每次取用尽量减少暴露空气中的时间,取用后及时封口,避免 pH 快速升高)。

如培养体系小,建议根据实际用量将添加物分装冻存,按比例配制使用,避免反复冻融。

#

建议细胞接种密度

#

细胞传代时间

一般为 3 天(72h)左右。不同 hMSC 生长速度有差异,推荐以细胞汇合度选择准确传代时机,汇合度80-90%左右传代,汇合度过高(>95%)会影响后续细胞生长。

#

细胞形态

梭形,呈旋涡状生长。


03

原代培养

✔ 分离脐带华通氏胶组织,使用组织块贴壁法进行原代培养。每个T75培养瓶接种0.5g华通氏胶。37℃细胞培养箱培养1-2h后加入6-8ml培养基。D2-D3补充培养基5ml,D7-D10天换液,弃去上清,加入新培养基10-15ml,D12-D14天观察扩增情况,进行消化传代。

✔ 细胞最早爬出时间5-7天,镜下可以观察到少量零散细胞。

✔ 组织块贴壁效率高,贴壁的组织块多。

✔ 收获的细胞数更多。


04

传代培养


✔ 与市场同类型产品相比,具有更高的扩增效率,高代次细胞衰老较慢,能支持培养20代以上。


05

分析对比


  • 相同的接种密度和培养时间条件下, novastem-MSC 体系P1-P5平均倍增次数为17.46倍。

  • 以一根脐带为例,如分离约5g华通氏胶组织,P0代可获得2.0×107细胞,P3代理论可获得9.8×1010的细胞。

  • 按照常规使用剂量单份5×107制备成产品,可制成1960份。

06

培养小结

#

细胞传代时间

一般为3天(72h)左右。不同hMSC生长速度有差异,推荐以细胞汇合度选择准确传代时机,汇合度80-90%左右传代,汇合度过高(>95%)会影响后续生长。培养基用量0.2mL/cm2。无需包被,连续培养3天无需换液。其他培养体系转换到novastem-MSC时,初始细胞扩增倍数可能较低。建议原培养基和novastem-MSC1:1混合后复苏接种,培养1代后可完全转换到novastem-MSC体系。

#

细胞消化

建议选用比较温和的胰酶,例如Gibco TrypLE™ Express 酶 (重组,1X),用PBS1:1稀释,配制成胰酶工作液后使用。消化时间约3分钟,一般不超过5分钟。消化1-2分钟后,可轻轻拍打培养容器,观察到大多数细胞脱落时即可用培养基终止消化。

#

细胞冻存

建议DMSO终浓度5%。可以在消化前先配制DMSO:完全培养基=1:9(体积比)的冻存液,2-8℃预冷保存。待冻存细胞用完全培养基混匀后,缓缓加入等体积的冻存液,混匀后分装。

07

质控分析


培养基质检报告


放行检验合格后,出具相应的COA,主要检测项目包括性状、理化、安全性及功能性指标。

08

性能数据展示

#

细胞表面标记物检测

培养的hMSCs表面标记物检测:

  • CD73、CD90、CD105、HLA-ABC阳性率≥95.0%。

  • CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DRDPDQ阳性率≤2.0%。

#

细胞多项分化潜能

三系分化实验:

A

B

C

成骨分化

(茜素红染色)

成脂分化

(油红O染色)

成软骨分化

(阿利新蓝染色)




#

细胞免疫调控能力检测

培养的hMSCs具有抑制淋巴细胞增殖、促进Treg上调、促进Th1和Th17下调和抑制TNF-α的表达。




#

细胞迁移能力检测

Transwell研究

划痕试验

采用novastem-MSC干细胞无血清培养基培养的hMSCs,Transwell和划痕试验证明具有一定的迁移功能。




#

细胞染色体核型分析

连续培养的hMSCs核型检测结果:

未发现染色体数目或结构异常。




#

细胞体外成瘤性试验

连续培养的hMSCs体外成瘤性试验结果:

hMSCs在软琼脂克隆法中均无法形成克隆,提示其在体外不具备成瘤性。




09

订购信息




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