产品及特点

灭鲑气单胞菌(Aeromonas  salmonicida)是气单胞菌属(Aeromonas)细菌的一个种 ，是引起鲑鳟鱼类疖疮病及溃疡病的最主要病原菌 ，给鲑科 (Salmonidae)鱼类养殖带来严重损失。近年来研究表明，该菌宿主范围逐渐扩大，可感染除了鲑科外的其他水产动物，如刺参、斑点叉尾鲙、乌鳢和大菱鲆等。对灭鲑气单胞菌的检测主要依赖于传统的微生物分离培养鉴定方法，其操作过程费时、繁琐，且很难得到准确结果，常常延误病情的诊断，而且对于已感染该菌但尚未发病的鱼类，通过常规分离鉴定方法很难得到准确结果本产品是根据 PCR原理开发的灭鲑气单胞菌检测试剂盒，它具有下列特点：

1、即开即用，用户只需要提供 DNA模板。

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩增灭鲑气单胞菌。

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次，但只能用于科研。

规格及成分

运输及保存

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA的制备

1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

2、如果有 N个样品，则需要做 N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL灭鲑气单胞菌 PCR阳性对照的 10000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA放冰上待用。

二、设置 PCR反应(40μL体系)

3、对 N+2个样品，在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照，故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分：

4、按下表设置 PCR反应：

三、电泳检测

5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检测 PCR产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。