谷胱甘肽(GSH)是一种低分子清除剂,它可清除O2-、H2O2、LOOH。谷胱甘肽是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽,是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物,并且是GSH—PX和GST两种酶类的底物,为这二种酶分解氢过氧化物所必需,它并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤,最近还证明GSH也参与使维生素E恢复到还原态的作用,缺乏或耗竭GSH会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其中毒作用,这可能与增加氧化损伤有关,因而GSH的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。
检测原理:
DTNB 与 GSH 反应生成复合物,在 420nm 处有特征吸收峰;其吸光度与 GSH 含量成正比。
产品优点如下:
1、操作简便:全程约20分钟,可测96例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃至少存放6个月;呈色稳定,显色后1小时吸光度不变。
3、再现性好:批内CV=1.3%,批间CV=4.36%。
4、回收试验: X =99.5%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等,效果均佳。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为420nm)
2、台式离心机
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接按照说明书操作。
全血或红细胞:需用蒸馏水将全血或红细胞制备成10倍溶血液后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、上清液制备:取待测样本0.5ml,加试剂一应用液2ml混匀,3500~4000转/分离心10分钟,取上清液1ml进行显色反应。
2、显色反应:按步骤加入样本和试剂。混匀,静置5分钟,待测
3、420nm波长,1cm光径,比色测定各管吸光度值
注:**取样量:100μl
储存条件:
本试剂盒保存期:3个月。贮存温度:2~8℃。