自备仪器和用品: 分光光度计、离心机、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏
产品名称:果胶甲酯酶(PE)试剂盒直销
产品货号:GOY-016563
检测方法:滴定法
产品规格: 48样
产品分类:细胞壁代谢系列
测定步骤:产品仅用于科研
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入250μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项
1、试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
使用说明:
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用百奥莱博生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
海马神经元 Human左旋樟脑(标准品)质量规格:含量测定(-)-CAMPHOR
SLAMF6 Others Mouse 小鼠 SLAMF6 / Ly108 细胞裂解液 (阳性对照) 11-羰基-β-乙酰乳香酸(标准品)质量规格:含量测定3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID
小鼠肺腺癌细胞系;LA7953',4',5',5,7-五甲氧基黄酮(标准品)质量规格:含量测定3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE
CRELD1 Others Human CRELD1 细胞裂解液 (阳性对照) 金橙II(标准品)质量规格:检查OrangeΙΙ
SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS法莫替丁相关化合物B质量规格:美国进口Famotidine Related Compound B
人Apelin 36蛋白(AP36)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:AP36 Human AP36(Apelin 36) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组AP36浓度。
人突触核蛋白α(SNCα)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:SNC-A, aSYN, PD1,NACP, PARK1, PARK4, Human SNCα(Synuclein Alpha) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组SNCα浓度
人神经纤维网蛋白2(NRP2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:NRP2 Human NRP2(Neuropilin 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组NRP2浓度
果胶甲酯酶(PE)试剂盒直销人内皮型一氧化氮合酶(NOS3/eNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ECNOS, NOS Ⅲ, E-NOS Human NOS3/eNOS(Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组NOS3/eNOS浓度