产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自大肠杆菌 T-8(R. Croft)的 EciI 基因
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 100%
NEBuffer™ r2.1: 50%
NEBuffer™ r3.1: 50%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
- 注意事项
- 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。如需了解更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- 延时酶切可能产生星号活性。