BpuEI
产品介绍
- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
- 限制性内切酶酶切位点:CTTGAG(16/14)
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自短小芽胞杆菌( Bacillus pumilus 2187a)(C. Nkenfou)的 BpuEI 基因
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃ 1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 50%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 50% rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性 贮存溶液
300 mM NaCl
10 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
50% Glycerol
500 µg/ml BSA
pH 7.4 @ 25℃ 热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性 dam 甲基化: 不敏感 dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感 同裂酶 Bce83I+
- 注意事项
- 在 NEBuffer r1.1 和 NEBuffer r3.1 缓冲液中可能出现星号活性。
- 基于反应中酶的稳定性,除非增加酶量,否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
- BpuEI 需要在反应混合物中加入 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)以实现**活性(SAM 已添加在酶溶液中)。
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