光谱仪又称分光光度计，是一种将具有复杂成分的光分解成光谱线的科学仪器。那么今天来介绍一下分光光度计的原理以及操作流程！

分光光度计的测量范围一般包括波长范围为 380 至 780 nm 的可见光区和波长范围为 200 至 380 nm 的紫外区。 不同的光源有自己独特的发射光谱，因此可以使用不同的发光体作为仪器的光源。 钨灯发射光谱：钨灯光源发射的380-780nm波长的光谱光经棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱图； 该色谱图可作为分光光度计的可见光源。

一、分光光度计的原理：

分光光度计使用可以产生多种波长的光源。 通过一系列分光装置，产生具有特定波长的光源。 光线通过被测样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光度值，转化为样品的浓度。  . 样品的吸光度与样品的浓度成正比。

单色光辐射通过被测物质溶液时，被物质吸收的量与物质浓度和液层厚度(光程长度)成正比，关系如下：

A=-lg(I/I₀)=-lgT=kLc

式中：A为吸光度；

I₀ 为入射单色光强度；

I 为透射单色光强度；

T——物质的透光率；

k 为摩尔吸光系数；

L为待分析物质的光路，即比色皿的边长；

c 是物质的浓度；

物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是物质的物理常数。 当纯物质在一定条件下的吸光系数已知时，可将供试品在相同条件下配制成溶液，测定其吸光度，由上式可计算出供试品中该物质的含量 公式。 在可见光区，除了一些吸收光的物质外，很多物质本身不吸收光，但可以通过加入显色剂或在一定条件下显色处理来确定，因此也称为比色分析。 由于显色时影响色深的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，因此测定时应同时使用标准物质或对照物质。

二、分光光度计的操作方法：

1、打开电源，打开仪器开关，打开样品室暗箱盖，预热10分钟。

2.将灵敏度开关调到“1”档(如果零位调节器没有调到“0”档，则应选择更高的档位。)

3. 根据所需波长转动波长选择器旋钮。

4、将空白溶液和测定溶液分别倒入比色皿的3/4处，用镜头纸擦拭外壁，放入样品室，将空白管对准光路。

5、调零位调节器，暗箱盖打开，使读盘指针指向t=0。

6、合上暗箱盖，调节“100”调节器使空白管的t=100，待指针稳定后逐渐拉出样品滑杆，读出测量管的光密度值 并记录下来。

7、比色完成后，关闭电源，取出比色皿清洗，用软布或软纸擦拭样品室。