猪PD-1elisa检测试剂盒实验用途：PD-1是近年新发现的一个负性共刺激信号分子，其配体为PD-L1和PD-L2，共属于CD28／B7家族。PD-1／PD-L通路削弱、限制和／或终止T细胞、B细胞和骨髓细胞的活化及外周炎症的效应器功能；二者相互作用导致T细胞增殖抑制和细胞因子IL-2、IL-10和IFN-γ的分泌下降，在移植免疫、自身免疫及肿瘤免疫等体系中发挥着重要作用。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

操作技巧

1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18 C～25℃）、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等，要先查看水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。

2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次第要与说明书一起，否则可导致效果过错，试验重复性差。

3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗刷次数不要逾越说明书举荐的洗刷次数，洗液在反应孑L内停留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，形成孔问污染，导致假阴性或假阳性。

4.要保证加液量一起 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，形成显色不一致，判别过错。

 5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，避免显色过强。